血清選購(gòu)和使用注意事項(xiàng)
發(fā)布時(shí)間:2023-02-15 瀏覽次數(shù):435
聊聊血清選購(gòu)和使用注意事項(xiàng)
歡迎前往環(huán)凱官網(wǎng)咨詢了解環(huán)凱院士團(tuán)隊(duì)研發(fā)生產(chǎn)的胎牛血清(FBS)
Part 01 牛血清分類
胎牛血清FBS,母牛懷孕3-8個(gè)月時(shí)采血
新生牛血清NCS, 出生10天內(nèi)
小牛血清BCS,出生后 16-22周
供體血清 成年牛。
Part 02 外觀辨別牛血清品質(zhì)
血清為動(dòng)物來源,成分復(fù)雜,不同批次間會(huì)存在一些外觀上差別。一般情況下,它們的顏色可能是金黃色、紅色、琥珀棕色或者是介于三者之間。
淡黃色/透明:2小時(shí)內(nèi)國(guó)產(chǎn)新生牛血清,膽紅素含量較少
金黃色/透明:新生牛血清
金黃色/不透明:數(shù)天或更久小牛血清
淡黃色微紅/透明:進(jìn)口胎牛血清,如澳洲
淡紅色/透明或紅色偏深/透明:普通進(jìn)口胎牛血清,如南美
紅色偏暗/透明——普通胎牛血清;保存不好,出現(xiàn)血紅蛋白氧化
紅色/不透明:進(jìn)口小牛血清,透明度越差牛齡越大。
Part 03 牛血清的保存及使用
-15℃至-20℃保存。為避免反復(fù)凍融,建議無菌分裝成一次的用量,-20℃保存,效期內(nèi)均可使用;
2℃-8℃融化,過程中不時(shí)旋轉(zhuǎn)混勻,充分融解后使用或平衡至室溫使用,盡快使用完。
出現(xiàn)絮狀沉淀,最常見原因之一:融化過程中,各種蛋白如脂蛋白等聚集;一般不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量???00g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,常用0.22um PES材質(zhì)濾膜。為避免阻塞濾膜,建議離心取上清,加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,不要直接過濾血清。
所以建議分裝成一次性用量,避免反復(fù)凍融。
Part 04 血清是否需滅活或者輻照處理?
滅活過程,會(huì)破壞某些成分,如氨基酸,維生素,生長(zhǎng)因子等。所以只有特殊要求,會(huì)考慮對(duì)血清做滅活處理;如實(shí)驗(yàn)對(duì)血清某種組分敏感,常見需去除補(bǔ)體蛋白,一般免疫學(xué)相關(guān)研究中及肌細(xì)胞和干細(xì)胞培養(yǎng)中,需對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。
融化混勻后,置于56℃水浴30min熱滅活,同時(shí)不時(shí)旋轉(zhuǎn)混勻血清,30min后建議馬上轉(zhuǎn)移至冰上降溫。為減少對(duì)血清品質(zhì)影響,一次滅活量不宜過大。
γ射線輻照是滅活血清中病毒,一般情況下,25-40kGy和30-45kGy是常用輻射劑量。
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