教你正確使用移液槍，第一條就有很多人弄錯了
發(fā)布時間：2024-08-14 瀏覽次數：3634
移液槍是實驗室中常用的精確測量和轉移液體的工具，正確使用移液槍不僅關系到實驗結果的準確性，還關系到實驗人員的安全。因此，掌握移液槍的正確使用方法和注意事項至關重要。您知道嗎，如果只是簡單地遵從接下來這些技巧，您移液的準確性和重復性將可能會得到5%的提高。
1.最優(yōu)的量程范圍
大多數移液器的正常操作體積范圍是指示量程的（10-100）%。盡管這一范圍是可操作范圍，但隨著體積設定的下降性能參數將會發(fā)生變化。
100uL移液器的準確性參數在指示量程的50-100%的時為±0.8%。然而如果你移取10μL(或者指示量程的10%)，不準確度將會提高3倍，或者為（2.5-3）%。
所以獲得最佳性能的最優(yōu)量程范圍是指示量程的35-100%。盡量避免將一個移液器的體積設定少于最大體積的10%，而應該用小量程的移液器來進行小體積移液操作。
2.吸頭浸入深度
正確的吸頭浸入深度可以提高準確性高達5%，尤其對微量移液器相當重要。對于微量移液器，吸頭應該浸入（1-2）mm，而對于大量程的移液器，浸入深度應為（6-10）mm。
如果吸頭浸入的太深，吸頭內部的空氣就會被壓縮，造成過多的液體被吸入。殘留在吸頭表面的液體也可能會影響結果。
吸頭如果浸入的不夠充分，那么可能會吸入空氣，就會造成氣泡的形成和移取體積不準。兩者都會造成不準確的移液體積，
3.正確的吸液角度
吸液時吸頭盡可能以90度角浸入到樣品中，最好不要偏離垂直位置超過20°對于微量體積的移液器，以垂直角度移取溶液可以提高2.5%的準確性。
偏離垂直超過20°吸液將會導致不準確的量取-過多的液體將會被吸入，造成移液不準確。以60度角浸入，將會使你的液體吸取量超過所設定的0.7%。
4.保持一致性
保持一致的移液節(jié)奏和速度將會幫助你得到理想的、重復性更高的結果。保持節(jié)奏和速度的一致性可以將準確性提高5%。
保持一致的樣品分配、一致的樣品排液
注意區(qū)分潤洗吸頭和不適合潤洗的情況
潤洗吸頭2-3次可以在吸頭內形成同質膜，這樣可以提高0.2%的準確度性。
潤洗可以中和微量移液中的毛細效應，對于大體積移液，這可以使吸頭內部溫度與樣品溫度一致。
當移取熱的和冷的溶液時潤洗會對結果產生不利影響，如從冰浴中移液或者溶液溫度超過37攝氏度，潤洗可能會造成高達5%的錯誤率。
5.避免溫度變化
恒定的室溫：移液和校準的理想溫度是21.5℃±1℃。避免在有風或者有陽光直射，溫度變化較大的區(qū)域操作，這些區(qū)域可能會降低移液的精準度。
保證足夠的平衡時間:除非另有其他要求，否則請保證足夠的時間來使您的液體樣品和移液器達到平衡溫度。
手溫效應長時間使用移液器，來自手的熱量可能會加熱移液器一導致移液器內部的空氣受熱膨脹從而會產生不準確的結果。
圖 移液槍的使用方法
6.移液槍的校準方法
6.1.準備超純水、萬分之一天平(如果校正 0.5~2.5ul量程的，至少要十萬分之的天平)、溫濕度計、恒溫室，還需準備一個小口容器，防止水分揮發(fā)。
6.2.按移液器總量程的 100%、50%、10%分別進行第三和第四步。
6.3.吸頭要反復吸取超純水三次后，吸取固定容積的超純水，推入放置在天平上的小口容器中，待數據穩(wěn)定讀取天平數值，同時記錄溫度。重復 10次。
6.4.將測量的數據用 ISO8655 中的計算公式計算獲得對應溫度下的體積，取平均值。
6.5.根據三個測量點的偏差，用移液器專用的校正扳手通過移液器的校正窗進行調整。
6.6.重復 3、4 步，直至偏差在 ISO8655 的要求內為止。
7.移液槍維護和保養(yǎng)
如不使用，要把移液槍的量程調至最大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。
最好定期清洗移液槍，可以用肥皂水或60%的異丙醇，再用蒸餾水清洗，自然晾干。
高溫消毒之前，要確保移液器能適應高溫。
校準是可以在20-25度環(huán)境中，通過重復幾次秤量蒸餾水的方法來進行
使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中，方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中，看看液面是否下降。
如今全自動儀器的推進，移液槍使用的頻率越來越少了，習慣了機器自動加樣，反而導致一部分人不會正確使用傳統(tǒng)移液槍，但是移液槍在轉移標本或者質控品的時候，又不能沒有。本文詳細介紹了移液過程中的如何提高精度，比如做BCA項目，潤洗槍頭和不潤洗差距很大，看完本篇文章，你應該會了吧？
來源：環(huán)凱轉載于“ 洞見IVD”公眾號，原作者~“DJ.IVD”，內容版權歸原作者所有；
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